高分辨质谱（QTOF/HRMS）

不可以的，必须是邮寄原始样品。可以是粉末、油状物、液体等，但不可以添加溶剂或者无机盐等

在ESI离子源的高分辨质谱测试中，样品分子[M]可以与不同的离子发生反应，形成不同的离子化物，其中常见的有[M+H]+、[M+Na]+、[M+K]+等。具体取决于实验条件和样品分子的性质。
通常情况下，[M+H]+是最常见的离子化物，这是因为在ESI离子源中，样品分子[M]在高电场下被电离后会失去一个电子，与离子源中的质子结合形成[M+H]+。而[M+Na]+则是指样品分子[M]失去一个电子后与离子源中的钠离子结合形成的离子，分子式为[M+Na]+。如果离子源中存在的是钾离子，那么就会形成[M+K]+的离子化物。
waters仪器测试完可以给出误差数据，软件内置的计算方式是[M+H]、[M+Na]等，如果需要计算[M+H]+、[M+Na]+的误差，需要自行手动计算。
计算公式：(理论分子量-实测分子量)÷理论分子量
误差要求：误差小于±5×10^-6即5ppm则说明误差在要求范围内，非理论分子量-实测分子量的绝对值

## 一次意外的“消失”

实验室里，研二学长小明看着屏幕，眉头紧锁。

他培养了大半年的天然产物样品，理论分子量是 487.25。按照文献方法设置好质谱参数，跑完一看——**什么信号都没有**。

“你会不会没加雾化气？”旁边师姐问了一句。

“加了呀，所有参数都按文献来的。”

“那你用的是什么模式？”

“......啊？”

屏幕上的“Positive Mode”和“Negative Mode”，小明从来没想过这会影响结果。半小时后，他换成负离子模式重新跑了一遍——487.25的峰出现了，信号还挺强。

这个故事告诉我们：有时候，不是你的样品有问题，而是模式没选对。

## 什么是正离子模式和负离子模式？

在说选择之前，我们先得弄明白这两个模式到底在做什么。

### 质谱仪的本质：一个“称”+一个“分类机”

你可以把质谱仪想象成一个极其精密的“天平”——它能精确称出每个分子的重量（质荷比，m/z）。但光称重还不够，质谱仪还需要把分子转化为可检测的信号，这就是“电离”的过程。

**正离子模式（Positive Mode，简称POS）**：在电离过程中，分子**失去电子**（或结合质子H⁺），变成带正电的离子，然后被检测器捕获。生成的离子通常是 [M+H]⁺、[M+Na]⁺、[M+NH₄]⁺ 等。

**负离子模式（Negative Mode，简称NEG）**：分子**获得电子**（或失去质子H⁺），变成带负电的离子。常见的离子形式有 [M-H]⁻、[M+Cl]⁻ 等。

### 电离机理：电子转移的微观世界

让我们深入一点，看看电离到底是怎么发生的。

在质谱的电离源（通常是ESI电离源）中，分子是如何获得或失去电荷的？

**正离子模式的机理：**

当液滴在电场作用下不断蒸发缩小到一定程度时，液滴表面的电场强度变得极强。此时，溶液中的分子会通过**质子化（protonation）** 过程获得正电荷：

- 溶剂中的H⁺（来自少量甲酸或醋酸）转移到分子上
- 或者，分子本身的某个原子（如氨基的N）抓住一个质子
- 最终形成 [M+H]⁺、[M+Na]⁺ 等加合离子

**负离子模式的机理：**

负离子模式则恰恰相反：

- 分子中的酸性氢（如羧基的-OH）脱离，形成 [M-H]⁻
- 或者，分子捕获了溶液中的Cl⁻、CH₃COO⁻ 等阴离子，形成 [M+Cl]⁻ 等加合离子

**为什么酸碱性这么重要？**

这其实是一个热力学问题。酸性分子（如脂肪酸）本身就倾向于“抛弃”它的质子，这个过程在负离子模式下被大大增强了；碱性分子（如胺类）则倾向于“接受”质子，在正离子模式下信号会更好。

## 到底该怎么选？核心原则只有一个

选择正负模式的核心原则是：**看你的分子更容易带哪种电荷**。

这听起来简单，但背后有一整套化学逻辑。我们可以从三个维度来考虑：

### 1. 看分子本身的“酸性”或“碱性”

这是最直接的因素。

**适合用负离子模式的情况：**
- 分子中含有**酸性基团**，比如羧基（-COOH）、磺酸基（-SO₃H）、磷酸基（-PO₃H₂）
- 这些基团特别容易“脱掉”一个质子（H⁺），变成 [M-H]⁻
- **典型例子**：脂肪酸、核酸、氨基酸（带酸性侧链）、糖类化合物

**适合用正离子模式的情况：**
- 分子中含有**碱性基团**，比如氨基（-NH₂）、吡啶环、季铵盐
- 这些基团特别容易“抓住”一个质子（H⁺），变成 [M+H]⁺
- **典型例子**：生物碱、胺类化合物、含氮杂环药物

### 2. 看分子量范围

不同电离模式对分子量范围的敏感度不同：

- **正离子模式**：对**小分子**（尤其是分子量 < 1000 Da）非常敏感，信号往往更强
- **负离子模式**：对**中等分子量**（1000-3000 Da）和一些特定的聚合物表现更好

如果你不确定，先试正离子模式是个不错的选择，因为它适用范围更广。

### 3. 看样品本身的特性

- **纯度**：如果样品比较纯，两种模式都可以尝试
- **复杂性**：如果样品很复杂（比如天然产物提取物），可能需要两种模式都跑一遍，因为不同化合物在不同的模式下响应不同
- **干扰物**：如果你的样品中含有大量在某种模式下会产生强干扰的杂质，换一种模式可能就柳暗花明

## 实战指南：一张表帮你做决定

| 化合物类型 | 推荐模式 | 常见离子形式 | 小贴士 |
|-----------|---------|-------------|--------|
| 脂肪酸、羧酸类 | **负离子** | [M-H]⁻ | 负离子模式下信号很强 |
| 氨基酸、肽类 | **正离子**（为主）| [M+H]⁺ | 常用 [M+H]⁺ 或 [M+Na]⁺ |
| 糖类、苷类 | **负离子** | [M-H]⁻ 或 [M+Cl]⁻ | 加一点 NaCl 可以增强信号 |
| 生物碱、胺类 | **正离子** | [M+H]⁺ | 正离子模式下灵敏度很高 |
| 核酸、核苷酸 | **负离子** | [M-H]⁻ | 磷酸基团让它天然带负电 |
| 维生素、激素 | 两种都可能 | 视具体具体结构而定 | 建议两种都试试 |
| 聚合物 | **负离子** | [M-H]⁻ | 负离子模式往往更稳定 |

## 常见误区：别再踩这些坑了

### ❌ 误区一：只用一个模式测所有样品

很多新手跑完质谱，发现没有目标峰的信号，就以为样品有问题。实际上，可能只是模式选错了。**同一样品，用正负两种模式跑，结果可能完全不同**。

### ❌ 误区二：盲目追求高信号

信号强不代表结果好。有时候负离子模式下信号很强，但噪声也很高；或者出现了大量不需要的碎片离子。**看信噪比（S/N）比看绝对信号强度更重要**。

### ❌ 误区三：忽视溶剂和添加剂的影响

- **正离子模式常用溶剂**：甲醇、乙腈（加0.1%甲酸或醋酸可以增强质子化）
- **负离子模式常用溶剂**：甲醇、水（加一点氨水或醋酸铵可以改善离子化）

如果你发现信号总是不理想，不妨检查一下是不是溶剂体系没选对。

### ❌ 误区四：忽略分子本身的电离倾向

有些化合物既不含强酸性基团也不含强碱性基团（如烷烃、苯系物），在常规ESI条件下可能很难电离。这时候可以考虑：
- **衍生化处理**：比如对烷烃进行磺化处理，引入可电离基团
- **更换电离源**：APCI可能更适合这些非极性化合物

## 建议的实验流程

对于研一新生，我的建议是：

1. **先了解你的样品**：它是什么类型的化合物？含有哪些官能团？
2. **先尝试正离子模式**：因为它对小分子更敏感，适用范围广
3. **如果没有理想结果，换负离子模式试试**：特别是当你知道样品中含有酸性基团时
4. **如果还不满意，考虑调整溶剂体系**：添加适当的添加剂
5. **两种模式都跑一遍**：如果你的目标是全面分析一个复杂样品（比如代谢组学研究），这是标准做法

## 进阶思考：为什么两种模式会看到不同的峰？

这是一个很有意思的问题。同一个样品，在正负离子模式下，不仅信号强度不同，有时候甚至会看到**完全不同的峰**。

原因主要有三点：

1. **不同的电离效率**：不同分子对质子化/去质子化的倾向不同
2. **不同的碎片化模式**：同一种分子在正负模式下可能产生不同的碎片离子
3. **不同的基质效应**：样品中的杂质在两种模式下的干扰程度不同

这也是为什么在代谢组学、天然产物分析等领域，**双模式检测**是常规做法——它能帮你看到更全面的“化学图景”。

## 写在最后

高分辨质谱的正负模式选择，没有绝对的标准答案，更多是一种“经验+科学”的综合判断。随着你实验做得越来越多，你会逐渐形成自己的“感觉”——看到一种化合物就知道它更适合哪种模式。

但比这更重要的是：**不要害怕尝试**。两种模式都跑一遍，最多也就是多花十几分钟的事情，但很可能就能帮你找到那个隐藏的信号峰。